甲苯胺藍染色是常用的人工合成染料的一種,屬于醌亞胺染料類,這類染料一般含有兩個發色團,一個是胺基,一個是醌型苯環,來構成色原顯色。染料除有發色團外,還要有能使色原對組織及其他被染物產生親和力的原子團即助色。助色團能促使染料產生電離成鹽類,幫助發色團對組織產生染色力, 使切片上的組織細胞著色。甲苯胺藍不僅含有兩個發色團,還含有兩個助色團,為堿性染料,甲苯胺藍中的陽離子有染色作用,組織細胞的酸性物質與其中的陽離子相結合而被染色。
甲苯胺藍染色方法
試劑
1.甲苯胺藍液
甲苯胺藍0.5g蒸餾水定容至100mL
2.冰醋酸液
冰醋酸0.5ml蒸餾水定容至100mL
染色步驟
(一)
1.組織切片常規脫蠟至水。
2.入甲苯胺藍液30min。
3.稍水洗。
4.入冰醋酸液分化,直到胞核和顆粒清晰。
5.稍水洗,用冷風吹干。
6.二甲苯透明,中性樹膠封固。
(二)
①切片脫臘至水。
②蒸餾水浸洗3次。
③0.1%甲苯胺藍液浸染10min。
④水洗,洗去多余染液。
⑤各級酒精脫水。
⑥二甲苯透明,中性樹膠封固。
試劑的配制
稱取0.1g甲苯胺藍,溶于100ml 0.1M醋酸鹽緩沖液中,置室溫5天后,即可使用染液于室溫下可保存3個月,若放于4℃冰箱則可保存半年左右,但該液的染色效果在早期好,若染液存放時間較長,則染色偏淡,應適應延長染色時間。
注意事項
1、使用本試劑時建議先取 1-2 個樣品做預實驗。樣品數量很多時,可使用染色架和染色缸,以便于操作。
2、本產品為 1%濃度水溶液,具體使用濃度可自行稀釋。
3、由于溫度對染料的溶解度與著色力有很大的影響,若快速染色,當室溫較低時,可以適當加溫。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
提示:本品僅用于科研實驗,不能用作醫療及臨床診斷。
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