Panbio登革熱IgM 捕獲ELISA法

廣州健侖生物科技有限公司

Panbio登革熱IgM 捕獲ELISA法 原理：IgM群血清抗體和粘附在微孔測試板聚笨乙烯表面上的抗人IgM抗體相結(jié)合。用抗原稀釋液把登革熱1~4號(hào)抗原濃縮液稀釋到恰當(dāng)?shù)墓ぷ魅萘俊？乖衫ハx細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)和一種免疫純化的單克隆抗體制得而成。在稀釋抗原中加入適量的辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合單克隆抗體（MAb）形成抗原-MAb復(fù)合物。洗去測試板內(nèi)的殘存血清，加入抗原-MAb復(fù)合物。孵育后，洗滌微孔板，加入無色底物，四甲基聯(lián)苯胺/過氧化氫（TMB/H2O2）。底物被酶水解后變成藍(lán)色。加酸終止反應(yīng)后，TMB變成黃色。顏色的變化表明測試樣本中有抗登革熱IgM抗體。

用于體外診斷用

(i) 用在準(zhǔn)備對(duì)照時(shí)的所有人類來源的材料在測試對(duì)人類缺陷性病毒1和2（HIV1和2）、丙型肝炎病毒以及乙型肝炎病毒表面抗原抗體時(shí)，都為陰性。但是沒有哪種方法能夠*保證，所以所有的人體對(duì)照和抗原都應(yīng)該認(rèn)為是潛在的感染源。疾病預(yù)防控制中心和國家健康署建議可能傳染的抗原應(yīng)該在2級(jí)生物安全下進(jìn)行處理。

(ii) 這種測試只能用血清。用全血、血漿或是其它的樣本間質(zhì)不能做。

(iii) 黃疸的或黃體脂蛋白血清，或表現(xiàn)出溶血的，或有細(xì)菌生長的血清都不可用。

(iv) 不要加熱失活的血清。

(v) 在開始實(shí)驗(yàn)前，所有的試劑必須要平衡至室溫（20~25ºC）。試驗(yàn)受到室溫變化的影響。只有達(dá)到了室溫才能把微孔板從密封包里拿出來。

(vi) 用干凈的槍頭直接在瓶子里配試劑。轉(zhuǎn)移試劑可能會(huì)導(dǎo)致污染。

(vii) 未用過的微孔板，應(yīng)立即重新封存，并儲(chǔ)存有干燥劑的地方。如果不這樣做可能會(huì)造成錯(cuò)誤的結(jié)果。

(viii) 底物系統(tǒng)

(a) 由于TMB易受金屬離子污染影響,所以不允許底物系統(tǒng)和金屬表面接觸。

(b) 避免長時(shí)間暴露于陽光直射下。

(c) 一些洗滌劑可能會(huì)干擾TMB的表現(xiàn)。

(d) TMB可能會(huì)有一些淡藍(lán)色。這個(gè)不會(huì)影響底物的活性或者試驗(yàn)的結(jié)果。

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