細胞培養所必需的L－谷氨酰胺在水溶液中性質不穩定，分解后會生成對細胞有害的氨。已知氨能夠抑制細胞的生長及目標物的生成，于是人們開始使用L－丙氨酰－L－谷氨酰胺（丙氨酰谷氨酰胺、Ala-GluNH2）來代替L－谷氨酰胺。丙氨酰谷氨酰胺是L－丙氨酸和L－谷氨酰胺縮合而成的二肽，在水溶液中的穩定性高，不易生成氨，因此可以進行更長時間的培養。
    在此，我們將介紹使用L-8900型高速全自動氨基酸分析儀，對包括丙氨酰谷氨酰胺在內的42個氨基酸成分進行測定的例子。本例中，我們分別采取生理體液分析和高分離度生理體液分析雙柱聯用方式進行了測定，同時還將介紹添加了丙氨酰谷氨酰胺的培養基測定例。
 
■標準樣品與培養基的測定例（使用生理體液分析柱）
 
分析條件

氨基酸標準溶液測定例

氨基酸標準溶液測定例（各2 nmol/20 μL（部分成分除外）） 

 

樣品前處理

 
添加了Ala-GluNH2的培養基的測定例 

添加了Ala-GluNH2的培養基的測定例（前處理后進樣20 μL）

   使用生理體液分析柱對42個氨基酸成分進行了測定。在標準分析方法中，Ala-GluNH2的出峰位置與Cys重疊，但對梯度程序進行了優化后，便可以分離出Ala-GluNH2的峰，從而可以與其他氨基酸一樣對該二肽進行定性和定量分析。
 
■標準樣品與培養基的測定例（高分離度生理體液分析雙柱聯用）
 
分析條件
 

 
氨基酸標準溶液測定例

氨基酸標準溶液測定例（各2 nmol/20 μL（部分成分除外））
 

樣品前處理
 

 
添加了Ala-GluNH2的培養基的測定例

添加了Ala-GluNH2的培養基的測定例（前處理后進樣20 μL）

    如果采用高分離度生理體液分析雙柱聯用，可以進行更高分離度的測定。由于雙柱聯用可以通過將兩根色譜柱串聯的結構對壓力進行分散，因此能夠實現高速、高分離度的分析。這樣不僅可以*分離Val 和Ala-GluNH2，而且還能夠改善中間洗脫出的Ile、Leu、Tyr的峰形，實現更高精度的定量分析。

氨基酸成分名列表



本例使用日立L-8900全自動氨基酸分析儀進行測定，關于此儀器請參考：http://www.instrument.com.cn/netshow/SH102446/C138114.htm

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