超微量分光光度計(jì)是精密光學(xué)儀器,出廠(chǎng)前經(jīng)過(guò)精細(xì)的裝配和調(diào)試,如果能對(duì)儀器進(jìn)行恰當(dāng)?shù)木S護(hù)和保養(yǎng),不僅能保證儀器的可靠性和穩(wěn)定性,也可以延長(zhǎng)儀器使用壽命。
設(shè)備出現(xiàn)問(wèn)題的幾率并不高,尤其是當(dāng)設(shè)備正常使用和日常維護(hù)時(shí),更多的問(wèn)題可能由外部因素導(dǎo)致,如樣品的均質(zhì)、顆粒物或氣泡干擾等。要定期對(duì)超微量分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)量,這樣才能有效避免儀器發(fā)生故障問(wèn)題。
標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)量
常用的標(biāo)準(zhǔn)品可使用BSA或核酸標(biāo)準(zhǔn)品,可從各試劑廠(chǎng)家購(gòu)買(mǎi),或使用如BCA定量試劑盒,QUBIT核酸定量試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品。請(qǐng)注意標(biāo)準(zhǔn)品一定要在效期之內(nèi),且保存得當(dāng)(通常低溫)。也可以使用設(shè)備廠(chǎng)家提供的小分子化合物標(biāo)準(zhǔn)品,如Implen提供的PHP標(biāo)準(zhǔn)品。標(biāo)準(zhǔn)品是有等級(jí)區(qū)分的,通常附帶有檢定證書(shū)的標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)稱(chēng)濃度會(huì)更準(zhǔn)確。
特別指出的是,使用未知濃度的樣品,來(lái)評(píng)估不同設(shè)備的測(cè)量結(jié)果,并以其中一臺(tái)作為基準(zhǔn),判定另外一臺(tái)的準(zhǔn)確性,是錯(cuò)誤的。
重復(fù)性測(cè)量
在缺乏標(biāo)準(zhǔn)品,或標(biāo)準(zhǔn)品由于保存不當(dāng)狀態(tài)已存疑時(shí),可使用未知濃度樣品做重復(fù)性測(cè)試。這可以判斷設(shè)備的穩(wěn)定性,以排除一些潛在問(wèn)題,如樣品臺(tái)損壞、樣品的非均質(zhì),成分干擾等。雖然不能確定準(zhǔn)確性誤差,但重復(fù)性很好的設(shè)備,很大幾率是沒(méi)有大問(wèn)題的。當(dāng)然,這需要結(jié)合您的允差要求,綜合考量。
梯度稀釋測(cè)量
使用已知濃度或未知濃度的樣品,均可進(jìn)行梯度稀釋測(cè)量,以驗(yàn)證設(shè)備的線(xiàn)性穩(wěn)定性。使用設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)功能可便捷地完成此項(xiàng)測(cè)試,并給出線(xiàn)性回歸。當(dāng)梯度稀釋的R2趨近于1,設(shè)備的線(xiàn)性可滿(mǎn)足廣泛的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)的測(cè)量要求,同時(shí)也可反映設(shè)備的良好狀態(tài)。需要注意的是,梯度稀釋時(shí)一定要選擇定期校準(zhǔn)過(guò)的,準(zhǔn)確性好的移液器,且正確操作。
基線(xiàn)穩(wěn)定性測(cè)量
光源和CCD檢測(cè)器,作為設(shè)備的核心組件,其穩(wěn)定性對(duì)于設(shè)備而言是非常重要的,而基線(xiàn)測(cè)量可以很好地反映這些部件的狀態(tài)。使用水(或空氣)作為空白,并且用水(或空氣)作為樣品,做多次重復(fù)測(cè)量,如果吸光值的漂移很小,通常可反映設(shè)備的光學(xué)系統(tǒng)組件狀態(tài)正常。
基線(xiàn)穩(wěn)定性測(cè)量
光源和CCD檢測(cè)器,作為設(shè)備的核心組件,其穩(wěn)定性對(duì)于設(shè)備而言是非常重要的,而基線(xiàn)測(cè)量可以很好地反映這些部件的狀態(tài)。使用水(或空氣)作為空白,并且用水(或空氣)作為樣品,做多次重復(fù)測(cè)量,如果吸光值的漂移很小,通常可反映設(shè)備的光學(xué)系統(tǒng)組件狀態(tài)正常。
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