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兩種儀器從檢測原理，到檢測對象，到儀器構造都不一樣。
檢測原理：紫外可見分光光度計是利用碘鎢燈（UV）和氘燈（visible）作為光源激發樣品，采集透過樣品的光強，并于透過參比樣的光強進行做差對比后，記錄樣品吸收光強隨激發波長變化得到的吸收光譜。
熒光光譜是利用碘鎢燈（UV）和氘燈（visible）作為光源激發樣品，采集樣品被激發后發射出的熒光光強隨隨激發波長變化得到的發射光譜。
檢測對象：紫外可見分光光度計檢測的是樣品從電子基態被激發到電子激發態的過程。
熒光光譜檢測的是樣品從電子激發態躍遷回到電子基態的過程。
儀器構造：紫外可見分光光度計采用是雙光路構造，激發光源被分束鏡分為兩束，一路經過待測樣品，一路經過參比樣。兩束光的光經過單色儀分光然后進入檢測器測量光強。最后傳送到計算機進行數據處理。
熒光光譜采用的是直角單光路構造，激發光源先經過單色儀分光，得到某一特定的波長的光，再透過樣品對其激發，在于樣品垂直的方向，另一個單色儀將檢測樣品發出的熒光進行分光后，進入檢測器測量光強。最后傳送到計算機進行數據處理。
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