橋式酶聯免疫吸附試驗方法（RSR Limited獨jia）在胰島自身抗體標準化項目或糖尿病抗體標準化項目中獲得了較高的靈敏度和特異性，本研究旨在探討ZnT8A在日本人群自身免疫介導的1型糖尿病的鑒定和特征識別中的意義。

應用橋式酶聯免疫吸附試驗（RSR Ltd.，Cardiff，UK）檢測ZnT8A，GADA和IA-2A。

來自日本7家醫院的日本裔受試者，具體疾病分型和入組人數如下：

表1總結了288名健康對照組的ZnT8A結果，并與制造商(RSR Ltd.，n = 297)的結果進行了比較。288例健康對照組ZnT8A的平均水平為3.8±2.3 U/mL，中位水平為3.7 U/mL(范圍，0.0 - 28.0 U/mL)。雖然平均和中位水平高于RSR正常對照組，但由于SD值較小(2.3 U/mL)，故平均+ 3SD (10.7 U/mL)和第99百分位(9.6 U/mL)低于RSR對照組。因此，我們將日本人群的臨界值設置為10.0 U/mL。根據該標準，288名健康對照組中有3名(1.0%)ZnT8A濃度為11.3、13.4和28.0 U/mL，且這些參與者均未發現GADA或IA-2A陽性。

本研究顯示，ZnT8A在急性起病1型糖尿病患者中的檢出率明顯高于緩慢進展或暴發性1型糖尿病患者（P<0.05）。

圖1 1型糖尿病患者（急性起病、暴發性、緩慢進展）、2型糖尿病患者和健康對照組中的 ZnT8A濃度

Kawasaki等人此前報道，使用放射配體結合法檢測暴發性1型糖尿病患者中ZnT8A的陽性檢出率，結果為0。雖然本研究中能夠檢測到2例ZnT8A陽性的暴發性1型糖尿病患者，但這2例患者的ZnT8A水平分別為11.7和14.0 U/mL，低于廠商臨界值，這表明暴發性1型糖尿病患者對ZnT8分子基本沒有體液自身反應。這些結果與之前的研究一致，ZnT8A反映了自身免疫介導的β細胞破壞。而暴發性1型糖尿病的主要病因是病毒感染β細胞后的先天免疫，非自身免疫機制。

文章研究了急性起病和緩慢進展1型糖尿病患者的ZnT8A陽性檢出率與糖尿病病程之間的關系（圖3）。結果發現，隨著糖尿病持續時間的延長，三組患者ZnT8A的陽性檢出率均有所下降（37.7、28.6和15.3%；P<0.001；圖3a）。同時觀察到ZnT8A水平與病程呈顯著負相關（r= -0.350，P<0.001；圖3b）。

圖3 ZnT8A陽性或水平與急性起病和緩慢進展1型糖尿病患者糖尿病病程的相關性

文章進一步分析了118例病程在5年內的1型糖尿病患者（急性起病和緩慢進展）的采樣年齡與GADA和/或ZnT8A陽性檢出率之間的關系。

發現ZnT8A在≤10歲患者中的陽性檢出率(52.9%)明顯高于其他年齡組（P<0.05）。此外，與年齡≥11歲的患者(3.6%，3/84)相比，額外檢測GADA增加了≤10歲患者(11.7%，4/34)的診斷靈敏度（表4）。因此推薦年齡≤10歲患者進行GADA和ZnT8A聯合檢測。

此外，通過多變量logistic回歸分析評估了ZnT8A的存在與臨床及免疫學參數的關系。在此過程中，根據受試者工作特征曲線，研究者發現采樣年齡的最佳截止點為11歲（靈敏度46.3%，特異性77.9%）。ZnT8A的存在與性別、持續時間和GADA的存在無相關性。然而，ZnT8A陽性與更小的發病年齡(OR=2.64, 95%CI 1.00-6.97, P = 0.049)和IA-2A的存在(OR=2.97, 95%CI 1.24-7.12, P = 0.015)相關（表5）。

表4 發病時間≤5年的急性起病和緩慢進展1型糖尿病患者的GADA和ZnT8A的存在與年齡的關系

表5 Logistic回歸分析 發病時間≤5年的急性起病和緩慢進展的1型糖尿病患者臨床和免疫學參數與ZnT8A陽性的相關性

1. 24.7%的1型糖尿病患者和5.2%的2型糖尿病患者的ZnT8A陽性（自建臨界值，10 U/mL）。

2. 急性起病1型糖尿病患者和≤10歲的患者ZnT8A的陽性檢出率較高。

3. 在ZnT8A陽性患者中，ZnT8A水平與病程呈顯著負相關。

4. ZnT8A陽性與采樣時的年齡和IA-2A陽性相關。

參考文獻：

1. Kawasaki E, Oikawa Y, Okada A, Kanatsuna N, Kawamura T, Kikuchi T, Terasaki J, Miura J, Ito Y, Hanafusa T. Zinc transporter 8 autoantibodies complement glutamic acid decarboxylase and insulinoma-associated antigen-2 autoantibodies in the identification and characterization of Japanese type 1 diabetes. J Diabetes Investig. 2020 Sep;11(5):1181-1187.

2. Grace SL, Cooper A, Jones AG, McDonald TJ. Zinc transporter 8 autoantibody testing requires age-related cut-offs. BMJ Open Diabetes Res Care. 2021 Aug;9(1):e002296.