核酸在這幾年似乎變成了熱點詞匯,隨著疫情相關信息的傳播,許多先前不為大眾所知的診斷行業專業名詞逐漸為大家所知,如核酸檢測、試劑盒、咽拭子、假陰性等等。但實際上,核酸并不是疫情下產生的新名詞。
圖1:大眾認知的核酸檢測
核酸提取通常是開啟生物學研究的首步,而且提取的核酸質量高低也是決定下游實驗成敗的關鍵因素之一。無論后續的檢測、克隆、PCR、QPCR、建庫測序等等都需要核酸才能順利進行。今天我們就來簡單了解核酸提取的基本原理和方法。
1、核酸提取法種類有哪些?
現在常用的核酸提取法為離心柱純法和磁珠法等,但離心柱純化法效率低,步驟繁瑣。而由于檢測機構每天需要處理大量樣本,大都是采用自動化核酸提取儀配套磁珠法核酸提取試劑盒的方式進行核酸提取步驟。
2、更效率的核酸檢測法——磁珠法
磁珠法——通過裂解液裂解細胞組織樣本,從樣本中游離出來的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,蛋白質等雜質不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附攜帶核酸的磁珠移動至不同的試劑槽內,通過反復快速攪拌、混勻液體,經過細胞裂解、核酸吸附、洗滌與洗脫等步驟,終得到純凈的核酸。
圖2:磁珠法步驟
核酸純化的方法是影響所提取核酸質量的重要因素,只有高質量的核酸才能滿足下游的各種應用。
3、磁珠法的有利工具——磁珠分離架
Bel-Art 磁珠分離架具備更良好的質量
對于所有磁分離實驗,強大的分離架可以固定磁珠,以便親和配體(抗體,鏈霉親和素或核酸偶聯專用試劑)或在分析中添加或傾倒沖洗溶液。
圖3:磁珠分離架
Bel-Art 磁珠分離架具備可拆卸套筒,可提高液體傳輸效率!與競爭品牌相比,它們提供了更加好的質量和價值。
4、磁珠分離架 型號與特點
1、 50ml和15/5ml型號的獨立套筒使液體添加和移除更容易,液體意外損失更少;
2、 強大的磁鐵可快速固定磁珠;
3、 50ml和15/5ml這兩種型號的套筒上有彈簧柱塞允許磁珠在管壁的不同高度被收集;
4、 只需轉動管即可實現高效的珠?;旌希?/span>
5、 96孔PCR板型號有24個磁鐵,在管壁上吸住磁珠的同時緊緊地固定PCR板;
6、 標準尺寸平板型號全部覆蓋上了磁鐵,以接受所有標準尺寸的微板,不管它有多少孔;比如6孔,12孔,24孔,48孔,96孔的平板等;
7、 磁力架適合符合ANSI標準*的微孔板;
8、 透明的亞克力材質便于觀察試管的內容物。
*ANSI標準:ANSI SLAS 4-2004(R2012)
5、磁珠分離架使用注意事項
1、該產品具有強大的磁性,使用時不要接近電子器材等磁記錄物品;
2、 清潔時避免使用酒精等溶劑,以防止亞克力塑料開裂。
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