抑菌圈的實(shí)驗(yàn)步驟一共能分成幾步

來源：杭州澤析生物科技有限公司 2021年11月23日 10:46

　　抑菌圈是福萊明發(fā)現(xiàn)青霉素的過程中，提出的一個詞匯。青霉的培養(yǎng)皿的周圍是一個以青霉菌落為圓心的一個規(guī)則的圓，不生長細(xì)菌,而在遠(yuǎn)離青霉的地方有細(xì)菌生長。不生長細(xì)菌的地方，這個圓圈被福萊明稱為抑菌圈。

　　抑菌圈實(shí)驗(yàn)說明

　　抑菌圈法是衡量殺菌防霉劑效果的一種方式，主要用于測定殺菌防霉劑對細(xì)菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用，是定性或半定量的方法。通過殺菌防霉劑在瓊脂平板上的擴(kuò)散能力來初步篩選更有效的殺菌防霉劑品種。

　　用具和材料

　　霉菌培養(yǎng)皿，無菌吸管(或針筒)，圓片濾紙(直徑50px)，帶玻璃珠的無菌水，帶過濾漏斗的三角牌，鑷子，接種針(環(huán))，熔化狀態(tài)的瓊脂培養(yǎng)基(最好保溫于45℃左右水浴中)，一定濃度的藥劑，供試驗(yàn)用的菌種。

　　試驗(yàn)過程

　　1. 用接種環(huán)挑取各試管斜面的菌種于帶玻璃珠的無菌水中，用手振蕩數(shù)分鐘使孢子分散，過濾后制成混合孢子懸液。

　　2. 用無菌吸管(或針筒)向各培養(yǎng)皿中注入一定濃度的混合孢子懸浮液0.5mL。

　　3. 向各培養(yǎng)皿內(nèi)注入15Ml~20ml的熔化狀瓊脂培養(yǎng)基(約45℃)，將菌液與培養(yǎng)基混合均勻，待其冷卻。

　　4. 用鑷子將圓片濾紙?jiān)诓煌瑵舛鹊姆烂箘┲薪n片刻，取出置于帶菌培養(yǎng)基平板的中央，蓋上蓋子

　　5. 置適宜溫度下，培養(yǎng)2~3d，觀察濾紙片圓片周圍抑菌圈的有無及大小。

　　注意事項(xiàng)

　　1. 所有的操作用具和材料都要事先做滅菌處理，操作必須在無菌室(或無菌箱)內(nèi)于火焰旁進(jìn)行。

　　2. 霉菌、細(xì)菌、酵母菌等各種微生物都必須分別配置混合菌液，即這里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等諸種菌的分別混合液，并非霉菌、細(xì)菌和酵母菌的混合液。

　　3、混合菌液的濃度一般為106~108cfu/mL.

　　4. 倒入培養(yǎng)皿的瓊脂培養(yǎng)基溫度不能太高(一般為45℃左右)，否則會引起微生物死亡。也不能太低，因?yàn)榄傊瑫芸炷Y(jié)，以致攪拌不均勻，影響試驗(yàn)結(jié)果。

　　5. 各種微生物的最適生長溫度不同(例如霉菌一般為25~30℃，細(xì)菌一般為32~37℃等)，恒溫培養(yǎng)時宜分開放置。

　　結(jié)果評判

　　由于濾紙圓片所吸附的藥液慢慢向四周擴(kuò)散，因此在濾紙片的周圍就出現(xiàn)清晰的抑菌圈(加入該防霉劑對供試菌有抑制效果)。抑菌圈的大小代表藥劑抗菌力的高低。在一定的藥劑濃度范圍內(nèi)，藥劑的濃度越高則抑菌圈的直徑越大。此法同樣適合于測定單個菌的抗菌效果。

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