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前言：方法開發和驗證用于證明所有新儀器在現有儀器的操作范圍和可接受標準內，能夠提供相同的結果。將方法從一臺儀器轉移至另一臺儀器時，驗證要求取決于 GMP 指南，來確保結果的一致性和重現性。本研究展示了在使用紫外-可見 ChemStation 軟件的 Cary 8454 紫外-可見分光光度計與使用 Cary WinUV 軟件的 Cary 60 紫外-可見分光光度計之間的方法轉移。同時通過對比證明了兩種分光光度計系統結果的準確性和重現性。方法的任何其他驗證要求均需要滿足法規指南和可接受標準。

實驗部分設備： – Cary 8454 紫外-可見分光光度計 – 紫外-可見 ChemStation 軟件 – Cary 60 紫外-可見分光光度計 – Cary WinUV 軟件試劑 – 空白溶液： 0.00 mg/L 高氯酸空白 – 標準溶液： 40 mg/L、80 mg/L 和 120 mg/L 重鉻酸鉀 – 樣品溶液： 約 75 mg/L 重鉻酸鉀第 1 部分：確定分析波長使用 40 mg/L 的重鉻酸鉀樣品確定合適的波長，并使用 Cary 8454 和 Cary 60 紫外-可見分光光度計在該波長下生成校準曲線。儀器參數：Cary 8454 – ChemStation 軟件： 標準模式，光譜/峰任務 – 波長顯示： 200–800 nm – 積分時間： 0.5 秒 – 峰/峰谷查找： 查找并標注多兩個峰儀器參數：Cary 60 – WinUV 軟件： “掃描”應用程序 – 波長顯示： 200–800 nm – 掃描速度： 高級設置：數據間隔 3 nm – 基線： 所選校正 – 峰信息： 峰閾值 0.010，X 標注（圖 1）

方法開啟 Cary 8454 紫外-可見分光光度計，將燈預熱一小時。在預熱過程中，打開紫外-可見 ChemStation 軟件，選擇“標準模式”進行分析并輸入參數。預熱后，使用高氯酸空白進行空白讀數。使用 40 mg/L 高氯酸溶液采集單個光譜，從而確定分析波長。 Cary 60 紫外-可見分光光度計不需要預熱。打開 Cary WinUV 軟件，選擇“掃描”應用程序并輸入參數。使用高氯酸空白進行基線采集，然后采集 40 mg/L 重鉻酸鉀溶液的掃描結果。結果在 Cary 8454 紫外-可見分光光度計和 Cary 60 分光光度計上采集的重鉻酸鉀譜圖具有高度重現性，且在 257 nm 和 350 nm 處鑒定出了相同的峰（圖 2a 和 2b）。

 

結論 Cary 8454 紫外-可見分光光度計和 Cary 60 系統均分析快速且簡單易用。如本研究所示，兩種系統均有可輕松進行方法開發的軟件，能夠實現常規紫外-可見方法的快速設置。從 Cary 8454 紫外-可見分光光度計到 Cary 60 紫外-可見分光光度計的兩種方法的轉移結果證明，可實現重現性峰采集以及準確的標準品和樣品測定。本研究分析結果表明，Cary 60 紫外-可見分光光度計（也支持可選的 21 CFR Part 11 軟件工具）的性能，可確保法規監管實驗室在使用 Cary 60 執行之前為 8453 或 8454 儀器開發的方法時充滿信心。