抗原/免疫原發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化
疫苗開發(fā)中的免疫原發(fā)現(xiàn)流程
不同疫苗開發(fā)平臺(比如滅活病毒與DNA疫苗)之間的工作流程千變?nèi)f化,各有各的優(yōu)勢。CEPI(Coalition for Epidemic Preparedness Innovations),以及許多的其他機構(gòu),在*性流行病中推動了這些多樣化的對策以增加對抗感染源的成功率。
這里,我們重點介紹了利用重組蛋白作為免疫原開發(fā)疫苗的通用工作流程,其中提到的系統(tǒng)可以幫助您的研究工作。
1 篩選免疫原
采用噬菌體展示的方法篩選病毒抗原,作為潛在的疫苗候選物。
2 免疫原表征
免疫原性研究確認上述步驟發(fā)現(xiàn)的抗原是否會激發(fā)免疫反應(yīng)。如果抗原激發(fā)免疫反應(yīng)(常用ELISA檢測),那么這個抗原就被認為免疫原而繼續(xù)研究。更多的表征工作用于在后續(xù)的蛋白質(zhì)改造工程中將目標屬性引入免疫原。
3 蛋白質(zhì)(免疫原)改造工程
免疫原的一些屬性會導(dǎo)致注射入動物或人后出現(xiàn)不良反應(yīng)。因此,需要使用一些基因編輯工具,如CRISPR/Cas9,改造免疫原的DNA基因,從而消除這些屬性。
4 細胞轉(zhuǎn)染和克隆
待DNA序列優(yōu)化后,需要放大免疫原的生產(chǎn)用于后續(xù)測試。在這個階段,構(gòu)建高表達、單克隆源性的細胞株非常關(guān)鍵。這個階段涉及基因工程、轉(zhuǎn)染以及單細胞克隆,尤其是采用哺乳動物細胞株作為宿主細胞。
5 篩選表達量和質(zhì)量屬性
在單細胞克隆后,監(jiān)測細胞的生長并評估表達量。純化并制備免疫原用于動物注射以激發(fā)免疫反應(yīng)。待動物產(chǎn)生抗體后,通過病毒中和試驗評估疫苗效力。
重點產(chǎn)品
QPix 400系列微生物克隆篩選系統(tǒng)結(jié)合智能圖像分析和自動化用于快速高效地篩選大型文庫。
- 可實現(xiàn)3000個克隆/小時的挑取,簡化工作流程。
- 除了微生物克隆篩選,系統(tǒng)還可以自動化多個樣品準備和孔板操作步驟,比如轉(zhuǎn)移菌液至瓊脂板然后涂布。
具備數(shù)據(jù)追溯和分析模塊,QPix系統(tǒng)的軟件可以簡化復(fù)雜、重復(fù)過程的控制和管理。