詳細介紹
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)elisa試劑盒實驗方法 操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Mouse Histone Deacetylase,HD ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換。
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)elisa試劑盒實驗方法 一、標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)elisa試劑盒實驗方法 二、注意事項
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時內進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
6. 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。
三、實驗前準備
1.使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫用蒸餾水1︰4倍稀釋成應用樣品稀釋液
5.用應用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應用樣品稀釋液中,充分混勻待用。
海球菌 Marinococcus sp.
人小細胞肺細胞英文名稱:NCI-H446
莫格球擬酵母 Torulopsis mogii
猴菌
胎兒真皮成纖維細胞*培養基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
鮮綠青霉 Penicillium viridicatum
SHZ-88(大鼠腺細胞)5×106cells/瓶×2
FRhK-4(恒河猴胚腎細胞)5×106cells/瓶×2
宛氏擬青霉 Paecilomyces variotii
人腎實質細胞*培養基100mL
MN-c, 小鼠皮質神經元gersion
毛柄金錢菌(金針菇)
IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
大鼠神經膠質細胞*培養基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
黑木耳 Auricularia auricula
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
細黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus
NCI-H292(人肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
光帽鱗傘 Pholiota nameko
香菇 Lentinula edodes
羽扇豆根瘤菌 Bradyrhizobium lupini
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
HO-8910(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
Misoprostol (free acid) (50 mg)9-oxo-11。alpha。,16-dihydroxy-16-methyl-prost-13E-en-1-oic acid; Misoprostol (free acid)
AK-7 (5 mg)N-(3-bromophenyl)-3-[(hexahydro-1H-azepin-1-yl)sulfonyl]-benzamide; AK-7
15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin E2 (1 mg)9-oxo-11。alpha。,15R,19R-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15(R),19(R)-hydroxy PGE2; 15(R),19(R)-hydroxy Prostaglandin E2
Prostaglandin F2α dimethyl amine (50 mg)N,N,-dimethyl-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-amine; Dinoprost dimethyl amine|PGF2α dimethyl amine; Prostaglandin F2α dimethyl amine
15-keto Prostaglandin F2α (1 mg)9α,11α-dihydroxy-15-oxo-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 15-keto PGF2α; 15-keto Prostaglandin F2α
tetranor-PGFM (50 ug)9α,11α-dihydroxy-15-oxo-13,14-dihydro-2,3,4,5-tetranor-prostan-1,20-dioic acid; tetranor-Prostaglandin F Metabolite; tetranor-PGFM
CAY10410 (1 mg)11-oxo-prosta-5Z,12E,14Z-trien-1-oic acid; 9,10-dihydro-15-deoxy-Δ12,14-Prostaglandin J2|9,10-dihydro-15-deoxy-Δ12,14-PGJ2; CAY10410
Leukotriene F4 (100 ug)5S-hydroxy-6R-(S-。gamma。-glutamylcysteinyl)-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; LTF4; Leukotriene F4
5(R)-HETE (100 ug)5R-hydroxy-6E,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 5(R)-HETE
小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)elisa試劑盒實驗方法9(S)-HODE cholesteryl ester (100 ug)9S-hydroxy-10E,12Z-octadecadienoic acid, cholesteryl ester; 9(S)-HODE cholesteryl ester
Half Volume 96-Well Solid Plate (black) (5 ea)Half Volume 96-Well Solid Plate (black)
8-Isoprostane EIA Antiserum (100 dtn)8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α; 8-Isoprostane EIA Antiserum