詳細介紹
雜交瘤細胞;SU-211-10圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤細胞;SU-211-10圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C6
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
脂多糖結合蛋白(LBP)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Lipopolysaccharide Binding Protein (LBP)
半胱氨酸豐富分泌蛋白2(CRISP2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cysteine Rich Secretory Protein 2 (CRISP2)
肌微管素相關蛋白9(MTMR9)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9)
核膜含血影蛋白重復蛋白1(Nesp1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Nesprin 1 (Nesp1)
蛋白酶激活亞基3(PSME3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Proteasome Activator Subunit 3 (PSME3)
復制啟動因子1(REPIN1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Replication Initiator 1 (REPIN1)
尿調蛋白(UMOD)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Uromodulin (UMOD)
受體活性修飾蛋白2(RAMP2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Receptor Activity Modifying Protein 2 (RAMP2)
甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2)
亨廷頓蛋白(HTT)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Huntingtin (HTT)
D-氨基酸氧化酶(DAO)單克隆抗體Monoclonal Antibody to D-Amino Acid Oxidase (DAO)
苯胺素(ANLN)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Anillin (ANLN)
信號淋巴細胞激活分子家族成員7(SLAMF7)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Signaling Lymphocytic Activation Molecule Family, Member 7 (SLAMF7)
JNK1/MAPK8關聯膜蛋白(JKAMP)單克隆抗體Monoclonal Antibody to JNK1/MAPK8 Associated Membrane Protein (JKAMP)
Tolloid樣蛋白1(TLL1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Tolloid Like Protein 1 (TLL1)
無翅型MMTV整合位點家族成員9B(WNT9B)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 9B (WNT9B)100 T 一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學法 )
2μg 克必隆 B 載體
50g 葡聚糖
500mL IMDM 培養基 ( 含 1% 雙抗 )
100mL DNA SDS 溶液,10%
一站式生物素檢測 TUNEL 試劑盒 (DAB 法 ) 81026-10 10 次
DNA 電泳分子量標準 (2)(300-5000 bp) 111108-50 50 次
25mg 生物素化的牛血清白蛋白
25g 疊氮
1Mu 青 G 鹽
1mL 螢火蟲熒光素
昆布多糖 CAS9008-22-4 100mg
抗凝血酶Ⅲ,10mg/mL 130534-1 1mL
50 次 柱式糞便 RNAout
50μL Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 )
30 次 AMV cDNA *鏈合成試劑盒
50μL 電泳 SYBR Green I
0.1 mL×10 Stbl3 感受態細胞
CpG 甲基轉移酶 (M.SssI) 120511-100 100U
超快核酸轉膜試劑盒 121110-5 5次
5次 TdT 加尾法 DNA 標記試劑盒
200mL 電泳丙烯酰胺溶液 ( 干粉型 )
2500mL TBE 電泳液 ,10×