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發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞；G1圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞；G1圖片
形態(tài)特性  上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

血管成素樣蛋白3(ANGPTL3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Angiopoietin Like Protein 3 (ANGPTL3)
膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Choline Acetyltransferase (ChAT)
整合素β5(ITGβ5)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Integrin Beta 5 (ITGb5)
封閉蛋白1(CLDN1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Claudin 1 (CLDN1)
Paralemmin蛋白(PALM)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Paralemmin (PALM)
甲酰肽受體1(FPR1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Formyl Peptide Receptor 1 (FPR1)
N-乙酰α-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGLU)單克隆抗體Monoclonal Antibody to N-Acetyl Alpha-D-Glucosaminidase (NAGLU)
細(xì)胞色素P450氧化還原酶(CPR)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Cytochrome P450 Reductase (CPR)
5-羥色胺受體2C(HTR2C)單克隆抗體Monoclonal Antibody to 5-Hydroxytryptamine Receptor 2C (HTR2C)
蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Protein Disulfide Isomerase A4 (PDIA4)
腎上腺素能受體α2C(ADRα2C)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Adrenergic Receptor Alpha 2C (ADRa2C)
白介素6(IL6)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Interleukin 6 (IL6)
瘤壞死因子受體超家族成員7(TNFRSF7)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 7 (TNFRSF7)
趨化素樣因子超家族成員6(CKLFSF6)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Chemokine Like Factor Superfamily 6 (CKLFSF6)
膜聯(lián)蛋白A10(ANXA10)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Annexin A10 (ANXA10)
含CUB域蛋白1(CDCP1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to CUB Domain Containing Protein 1 (CDCP1)
氨酰tRNA合成酶(RARS)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Arginyl tRNA Synthetase (RARS)10 次    柱式血液 mtDNAout，測序    
1g    硫酸卡那    
100g    DEAE 纖維素    
100 支    1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭 ( 盒裝已滅菌 )    
D- 氨基酸氧化酶    CAS9000-88-8    5 mg
VDAC1 小鼠單抗    140593-100    100 μL
非凍型拭子毒保存液    91103-100    100mL
20 次    免疫蛋白清除劑    
5g    3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸    
5mL    間充質(zhì)干細(xì)胞生長因子 - 無血淸    
1mL    胃蛋白酶抑制劑溶液，1 mg/mL    
角質(zhì)細(xì)胞生長因子    21-0170-5     5mL
RNase-free 鹽酸胍溶液 ,8M    100905-100    100mL
5次    PCR 法 DNA 探針標(biāo)記試劑盒    
5mg    氨基喋呤    
25mg    Genistein( 酪氨酸蛋白激酶抑制劑 )    
2mL    磁珠     
常規(guī) DNA 測序服務(wù)    D006-1    1次
Rosetta-gami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞    130559-10    0.1mL×10
1000μL    小鼠抗 SUMO 標(biāo)簽蛋白單抗    
500mL    甲醇    
100g    三氯    
96 支    10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌帶芯長尖 )    
200mL    自誘導(dǎo)培養(yǎng)基 (lac 啟動(dòng)子 )