詳細介紹
小鼠雜交瘤細胞;cTnT2圖片【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;cTnT2圖片
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該雜交瘤細胞由湖南遠泰生物技術有限公司制備并提交,細胞注射小鼠腹腔可產生高滴度的單抗,可用于基礎研究和臨床檢驗。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
130506-1.5海藻糖溶液,1.5M,PCR 1.5mL
天凈沙核酸濃縮劑30mL
EGY48 酵母菌種1mL
一管式 TMB 顯色液 A( 可溶型 ) 100mL
凋亡 DNAout24 次
CAS616-91-1N- 乙酰 -L- 半胱氨酸5g
131128I-100兩棲類和爬行類動物種屬鑒定 PCR Mix100 次
XhoI2000U
甘油100mL
L- 脯氨酸25g
Southern 植物 DNAout 10 次
CAS9007-34-5膠原蛋白Ⅰ型1g
12-224BL21-CodonPlus-RP 菌種1mL
血清白蛋白清除劑15 次
核糖核酸酶 T1100KU
萘啶酮酸5g
還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒250 次
CAS3671-99-6葡萄糖 -6- 磷酸二500mg
100827A-10菌種保存液10 管
伊紅 Y 二鹽,水溶性10g
交聯瓊脂糖凝膠 4B100mL
交聯瓊脂糖凝膠 4B100mL
山羊抗小鼠 IgG,熒光素 488 標記0.1mg
CAS4264-93-1萘酚 AS-TR 磷25mg
130578-100小鼠抗 V5 標簽單抗100μL
植物 RNA 提取高鹽溶液100mL
5,15-DPP (10 mg)5,15-Diphenylporphyrin|STAT3 Inhibitor VIII; 5,15-diphenyl-21H,23H-porphine
Chlorpromazine (hydrochloride) (500 mg)CPZ|Largactil|Promacid|Thorazine; 2-chloro-N,N-dimethyl-10H-phenothiazine-10-propanamine, monohydrochloride
5-Methyltetrahydrofolic Acid (1 mg)5-methyl THF|Prefolic A; N-[4-[[(2-amino-3,4,5,6,7,8-hexahydro-5-methyl-4-oxo-6-pteridinyl)methyl]amino]benzoyl]-L-glutamic acid
Benztropine (mesylate) (5 g)Cogentin|NSC 169913; (3-endo)-3-(diphenylmethoxy)-8-methyl-8-azabicyclo[3.2.1]octane, monomethanesulfonate
ICG-001 (25 mg)(6S,9aS)-hexahydro-6-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-8-(1-naphthalenylmethyl)-4,7-dioxo-N-(phenylmethyl)-2H-pyrazi,2-a]pyrimidine-1(6H)-carboxamide
GIT 27 (5 mg)VGX-1027; 4,
4-Thiouridine (25 mg)4-SU|NSC 518132; 4-
PF-04620110 (25 mg)trans-4-[4-(4-amino-7,8-dihydro-5-oxopyrimido[5,4-f][1,4]oxazepin-6(5H)-yl)phenyl]-cyclohexaneacetic acid
Epothilone A (5 mg)Epo A; (1S,16R)-7S,11S-dihydroxy-8,8,10R,12S-tetramethyl-3S-[(1E)-1-methyl-2-(2-methyl-4-thiazolyl)ethenyl]-4,17-dioxabicyclo[14.1.0]heptadecane-5,9-dione
CHIR1244-[(3S)-1-azabicyclo[2.2.2]oct-3-ylamino]-3-(1H-benzimidazol-2-yl)-6-chloro-2(1H)-quinolinone
LY27845443-[(4-chloro-2-fluorophenyl)methyl]-2-methyl-N-(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)-8-(4-morpholinylmethyl)-imidazo[1,2-b]pyridazin-6-amine