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SILAC(定量蛋白質(zhì)組學(xué))

一、SILAC(定量蛋白質(zhì)組學(xué))原理：
SILAC ( Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)技術(shù)是利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞增殖對(duì)必需氨基酸（Lys，Arg等）的依賴性原理而設(shè)計(jì)的代謝標(biāo)記蛋白質(zhì)的方法。以Lys為例，普通的Lys分子中有6個(gè)12C原子，用13C替代普通Lys中的全部12C原子，從而生成13C標(biāo)記的Lys。13C標(biāo)記的Lys要比普通的Lys多6Da。
比如兩組細(xì)胞，一組用含普通Lys的培養(yǎng)基培養(yǎng)（記為K0），一組用含13C的Lys培養(yǎng)（記為K6）。由于Lys是細(xì)胞增殖的必需氨基酸，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中13C標(biāo)記的Lys自然“摻入"到新和成的蛋白質(zhì)中，導(dǎo)致整個(gè)細(xì)胞的蛋白質(zhì)組被13C標(biāo)記的Lys所標(biāo)記。鑒于K0和K6兩個(gè)氨基酸存在6Da的質(zhì)量差異，所以在后續(xù)LC-MS/MS對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分析時(shí)，能同時(shí)完成樣品中蛋白質(zhì)的鑒定和定量（6Da的質(zhì)量差異）。根據(jù)定量結(jié)果，能直接判斷蛋白質(zhì)表達(dá)水平差異、區(qū)分特異性和非特異性相互作用等。
二、SILAC(定量蛋白質(zhì)組學(xué))特色：
（1）*進(jìn)的、進(jìn)行 細(xì)胞中 蛋白質(zhì)相互作用和 蛋白質(zhì)表達(dá)差異的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)；
（2）通過LC-MS/MS分析，能 同時(shí)實(shí)現(xiàn)對(duì)未知樣品中蛋白質(zhì)分子的 鑒定與定量；
（3）依據(jù)定量結(jié)果，能直接判定蛋白質(zhì)表達(dá)水平差異、區(qū)分特異性和非特異性相互作用等。

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