L-色氨酸的比旋度測定

1 前言

L-色氨酸是人體和動物所必需的 8 種必需氨基酸之一，不能通過自身合成，只能通過食物來攝取。L-色氨酸又被稱為第二必需氨基酸，目前廣泛應用于醫藥、食品、飼料等方面。隨著生產技術的不斷進步，微生物法替代了傳統的化學合成法和蛋白質水解法，占據了市場主導地位，主要產地集中在歐美、日本等少數地方。但目前在產業化生產 L-色氨酸的過程中，均會存留少量雜質，因此下游的分離純化工藝非常重要。

比旋光度是旋光物質的重要物理常數，可以用來檢測 L-色氨酸的純雜程度，進而為提升L-色氨酸的生產效率提供參考。

2 儀器與試劑

2.1 儀器

上海佳航--全自動旋光儀Digipol-P630

3 實驗方法

3.1 實驗步驟

（1） 色氨酸溶液

稱取約 1.0g 色氨酸，加入適量水，在水浴（60℃）中溫熱溶解，定容至 100mL， 制成每 1 mL 約含 10mg 的溶液。

（2） 空白測試

將控溫旋光管用三級水清洗 3 次以上，然后加滿水至管路中無氣泡。將旋光管水平放置于旋光儀中，連接溫控線，設置溫度 20℃，等待儀器溫度穩定后，點擊“清零”。

（3） 樣品測試

將控溫旋光管取出，用色氨酸溶液清洗 3 次以上，然后加滿溶液至管路中無氣泡。等待儀器溫度穩定后，點擊“測試”。

3.2 儀器參數

4 結果與討論

4.1 實驗結果

4.2 討論

兩次平行的結果均符合藥典中對于 L-色氨酸比旋度的要求(-30.0°~-32.5°)，此實驗能夠為L-色氨酸的純度測定提供一定的依據。

參考文獻

[1] 陳榮慶,劉偉,等.L-色氨酸的研究進展[J].安徽農業科學,2014,(14):4438-4440,4443.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].二部.北京:中國醫藥科技出版社,2015:388.

注意事項

1、本次實驗所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和三級水。

2、色氨酸略溶于水（1.1g/100mL，25℃），建議在水浴中溫熱溶解。建議先加入 50-60 mL 的水，攪拌溶解大部分樣品，再添加少量水至樣品全部溶解，再于冰水中冷卻至 20℃。后將樣品液和清洗液全部轉移至 100mL 容量瓶中，定容。也可使用超聲波儀器加速溶解。

3、溶液配制好后建議在 30min 內測試完畢。

4、可通過旋光管兩側的透光玻璃孔觀察管中是否有氣泡，同時檢查并擦凈玻璃上的水漬和污跡。

5、為旋光管更換樣品液時建議將儀器的溫控關閉。操作方法是將參數設置里的“溫度” 選項關閉。

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