應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
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剛果紅染色實驗服務
剛果紅的原理:
剛果紅篩選主要是根據菌落降解纖維素可以形成降解圈,氯化鈉沖洗再烘干后可以讓降解圈看的更清楚更易觀察、它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色復合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應在含有纖維素的培養基中加入剛果紅染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使結合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大大小小的透明因。
剛果紅染色法的使用:
方法一 :先培養微生物,再加入剛果紅進行焰色反應在長出菌落的培養基上,覆蓋質量濃度為1 mg/ml.的CR溶液,10~15 min后,倒去CR溶液,加入物質的量濃度為I mol/的NaCI溶液,15 min后倒掉NaCI溶液,此時,產生纖維素酶的菌落周圍將會出現透明圈。
(加NaCI的原因:剛果紅是結合到培養基的多糖底物,但分解纖維素的細菌可以產纖維素酶,能分解這個多糖底物成為賽糖,這樣剛果紅就不能結合上去了,氯化鈉就可以使結合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大小不--的透明圈, 大的透明圈分解纖維素的能力就強)。
方法二: 在倒平板時就加入剛果紅配制質量濃度為10 mg/ml的CR溶液,滅菌后,按照每200 ml。培養基加入1 ml。的比例加入CR溶液,混勻后倒平板。等培養基上長出茵落后,產生纖維素酶的菌落周圍將會出現明顯的透明圈。