化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>生命科學(xué)儀器>細(xì)胞培養(yǎng)儀器>細(xì)胞培養(yǎng)監(jiān)測系統(tǒng)>IML-116 RKO-LUC-EGFP(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光標(biāo)記(...
IML-116 RKO-LUC-EGFP(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光標(biāo)記(STR鑒定正確))
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱 上海淳麥生物科技有限公司
- 品牌
- 型號 IML-116
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2023/11/26 12:20:51
- 訪問次數(shù) 190
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胎牛血清,細(xì)胞株,原代細(xì)胞,耐藥細(xì)胞,LUC細(xì)胞,標(biāo)記細(xì)胞,大鼠細(xì)胞,小鼠細(xì)胞,ELISA試劑盒,感受態(tài)細(xì)胞,
一、細(xì)胞基本屬性 | ||||
細(xì)胞名稱 | RKO-LUC-EGFP(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光標(biāo)記(STR鑒定正確)) | |||
細(xì)胞別稱 | RKO-LUC-EGFP;人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記-綠色熒光標(biāo)記;人結(jié)腸腺癌細(xì)胞-LUC-EGFP | |||
種屬來源 | 人 | |||
組織來源 | 結(jié)腸 | |||
生長特性 | 貼壁生長 | |||
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | |||
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | |||
背景介紹 | Luciferase RKO細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。 該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。 RKO細(xì)胞是一個低分化的結(jié)腸癌細(xì)胞系。RKO細(xì)胞含有野生型p53,但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRβ1)。RKO細(xì)胞的p53蛋白的水平高于RKO-E6細(xì)胞,RKO細(xì)胞是RKO-E6細(xì)胞和RKO-AS45-1細(xì)胞的親本細(xì)胞系。RKO細(xì)胞在裸鼠中成瘤,且在軟瓊脂中形成集落。 | |||
puro藥篩濃度 | RKO-LUC-EGFP細(xì)胞puro藥篩濃度為1. 0ug/ml,培養(yǎng)過程中可不用再添加puro,如若擔(dān)心抗性隨著傳代時間降低,可定期用0.5ug/ml濃度puro維持 | |||
注意事項 | RKO-LUC-EGFP細(xì)胞經(jīng)過常溫運輸后,細(xì)胞狀態(tài)會改變,例如細(xì)胞縮起或者脫落,也會有部分細(xì)胞死亡,屬于正常現(xiàn)象,請收到細(xì)胞后放培養(yǎng)箱過夜穩(wěn)定 | |||
STR鑒定圖片 | ||||
生物安全等級 | 1 | |||
細(xì)胞規(guī)格 | 1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
支原體檢測 | 無 | |||
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-2577 | |||
培養(yǎng)基 | 90%MEM+10%FBS+PS | |||
培養(yǎng)條件 | 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ | |||
凍存條件 | 無血清凍存液,液氮儲存 | |||
細(xì)胞貨期 | 現(xiàn)貨,1周左右 | |||
運輸方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨(T25瓶免運輸費用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞 | |||
供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
特別說明 | 以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 | |||
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | ||||
收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
收貨處理 | 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài) | 收到細(xì)胞后,需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 | ||
傳代密度 | 細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細(xì)胞密度 | ||
傳代比例 | 傳代建議1:2傳代 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | 一管細(xì)胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
傳代方法 | a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗RKO-luc-EGFP細(xì)胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。 c、將RKO-luc-EGFP細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 | 將含有1 mLRKO-luc-EGFP細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查RKO-luc-EGFP細(xì)胞密度。 | ||
注意事項 | 1.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 2.因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。 | 1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存; 2.為保證細(xì)胞的高存活率,收到產(chǎn)品后,請立即解凍復(fù)蘇細(xì)胞。 | ||
到貨須知 | 1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。 3.由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。 | |||
備注:客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,我們隨時給予解答。 | ||||
三、細(xì)胞凍存操作 | ||||
凍存液配方 | 無血清凍存液,液氮儲存 | |||
細(xì)胞密度 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例 | |||
凍存方法 | a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,加 1 mL血清重懸細(xì)胞,進行細(xì)胞計數(shù)。 b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5x106~1x107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | |||
注意事項 | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案 | |||
四、售后服務(wù) | ||||
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn) | 1.細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā); 2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā); 3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā); 4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時后,干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā); 5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇 2 天后,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā); 6.細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā); 7.視具體情況而定。 | |||
不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā); 2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā); 4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā); 5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā); 6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā); 7.視具體情況而定。 |
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