白介素8受體(可溶性)ELISA KIT
- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/4/24 13:37:23
- 訪問次數 603
聯系方式:林經理18901934629 查看聯系方式
聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 一個月 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
---|
白介素8受體(可溶性)ELISA KIT
上海乾思生物白介素8受體(可溶性)ELISA KIT品牌代理經營進口胎牛血清、細胞因子、ELISA試劑盒、細胞、抗體、生物試劑、耗材、培養基、一抗、二抗、其產品吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,代做ELISA實驗等。完善的庫存及供應體系以及高效穩定的純化技術,保證產品均能現貨供應和產品質量的穩定性。
怎樣查到一個特定細胞株的相關知識和培養條件?
ATCC(American Type Culture Collection)收集了絕大多數細胞的詳細資料。打開ATCC網頁的Cells and hybridomas鏈接,輸入細胞名稱就可以搜索ATCC的細胞數據庫。數據庫中有每一種細胞的詳細描述,包括細胞的來源,培養和凍存條件,以及相關文獻等資料。
如何選用特殊細胞系培養基?
培養某類型細胞沒有固定的培養條件。MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣容易生長。總之,*MEM、DMEM做貼壁細胞培養;RPMI1640做懸浮細胞培養;各種目的無血清培養*AIMV培養基(SFM)。
測序實驗流程:
1 收集樣品
2 相關試劑 總RNA提取試劑TREzol Reagent (RNA提取試劑), M-MLV(cDNA逆轉錄酶), RNA 純化試劑, RealqPCR MasterMix (熒光定量PCR預混試劑)。
3 實驗儀器 熒光定量PCR儀; PCR儀;低溫離心機。
4 總RNA提取
5 cDNA合成 在0.5ml的離心管中加入1µl模板總RNA(1µg/µl); 2µl隨機引物(T18, 10pmol/ul);2µl 10mM dNTP mix;加水至15µl體系。混勻后70℃變性RNA 5分鐘,冰上速冷1分鐘,離心將溶液收集至管底加入6µl 5×PCR buffer;1µl RNaseout;1µl M-MLV RT;加水至30µl體系。PCR儀中反應條件設置 37℃延伸60min,70℃保溫15min終止反應。合成好的cDNA置于 -20 ℃保存備用。
6 引物設計與thermal cycler protocol thermal cycler protocol合成
7 實時定量PCR 按以下反應體系進行: 2x RealqPCR MasterMix(Modified DNA polymerase、SYBR Green I、Optimized PCR buffer、5mM MgCI2、dNTP mix including dUTP)25ul;上游引物F 1 ul,下游引物R 1 ul;cDNA template 2ul。定量PCR儀擴增反應條件設置:50 ℃ 2min ;95 ℃ 10min ;95℃ 15s --60 ℃ 60 s (40個循環)。
8 PCR產物溶解曲線分析 將所擴增的PCR 產物進行溶解曲線分析,單峰溶解曲線表示擴增產物單一,無非特異性擴增產物。溶解曲線生成的反應程序為: 95 ℃ 15s , 60 ℃ 15 s , 95 ℃ 15s。